Evaluación del Efecto de la Capsaicina Sobre la Expresión del Gen Trail (Ligando Inductor de Apoptosis Relacionado con el Factor de Necrosis Tumoral Tnf) en Células Madre Hematopoyéticas de Cordón Umbilical
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Date
2017-12-15
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Publisher
Universidad Católica de Santa María
Abstract
En los últimos años ha crecido el interés en terapias no convencionales contra el
cáncer, en especial la inmuno-terapia. Ésta utiliza anticuerpos o citoquinas para luchar
de manera específica contra células de cáncer. Entre las citoquinas estudiadas se
encuentra TRAIL (ligando inductor de apoptosis relacionado con el factor de necrosis
tumoral), esta ha generado gran interés por su capacidad de inducir apoptosis en varios
tipos de cáncer, sin embargo una desventaja de TRAIL es su poco tiempo de vida en
sangre, por lo que se necesita un vector de transporte de TRAIL hacia las células de
cáncer. Uno de los posibles medios de transporte de compuestos contra el cáncer, son
las células madre, ya que estas no presentan inmunogenicidad y además exhiben un
tropismo hacia los tumores.
El cordón umbilical es una fuente importante de células madre multi y/o
pluripotenciales, estas son de fácil obtención pues no se requieren de métodos
invasivos y su cultivo celular es sencillo.
En el presente estudio se evaluó el efecto de la capsaicina en la expresión de TRAIL
en células madre hematopoyéticas de cordón umbilical (HSCs).
Se estableció un cultivo celular primario de células madre hematopoyéticas, de cordón
umbilical. Estas fueron tratadas a diferentes concentraciones de capsaicina (50, 100 y
200 uM) y se evaluó apoptosis y necrosis utilizando microscopía de fluorescencia
mediante Hoescht y Yoduro de propidio respectivamente. Se observó un aumento de
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apoptosis hasta un 28.3% (± DS = 0.64) y la necrosis celular hasta un 4.6% (± DS
=0.14) También se evaluó el efecto de la capsaicina sobre la viabilidad celular
mediante el método de azul de trypan. Se observó una disminución de la viabilidad en
las células tratadas hasta un 57.34%.
Para el estudio de expresión génica se realizó una extracción de ARN de las células de
cada tratamiento y controles y se sintetizó cDNA. Posteriormente mediante qPCR se
amplificó el gen TRAIL y se evaluó la expresión relativa del gen por cuantificación
relativa utilizando el método de Livack o ΔΔcT, con GAPDH como gen de referencia
o housekipping y se determinó la expresión relativa del gen TRAIL. Los niveles
relativos de expresión del gen TRAIL en células tratadas con capsaicina aumentaron
significativamente en 18 veces (p< 0.05).
Se concluyó que la capsaicina aumentó significativamente la expresión relativa del gen
de TRAIL.
Description
Keywords
capsaicina, TRAIL, células madre, expresión relativa de genes, viabilidad, apoptosis, necrosis