Evaluación de la Capacidad Antioxidante del Extracto de la Microalga Haematococcus Pluvialis, por el Ensayo OracFL en el Lector de Placas Varioskan Lux
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Date
2019-01-23
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Publisher
Universidad Católica de Santa María
Abstract
El ensayo de la capacidad de absorbancia del radical oxígeno, más conocido como
ORAC, es un método para hallar la capacidad antioxidante de extractos y sustancias,
el cual expresa sus resultados en equivalentes Trolox. La astaxantina es uno de los
antioxidantes más potentes conocidos actualmente, y la microalga Haematococcus
pluvialis es capaz de sintetizar este antioxidante en situaciones de estrés. El interés
biotecnológico por el cultivo de esta microalga en los últimos años ha aumentado, y
se han generado diversas técnicas de cultivo, así como distintos tipos de
fotobiorreactores para su crecimiento, y todo esto debido al antioxidante que es capaz
de sintetizar, el cual es muy bien cotizado en el mercado de los antioxidantes (aprox.:
$3000/kg de astaxantina)(1).
En la primera parte del presente trabajo de investigación se diseñaron y se
construyeron, 3 fotobiorreactores air-lift, en los cuales se cultivó una cepa de
microalgas, que a la descripción microscópica coincidió con el género Scenedesmus y
Chlorella vulgaris. En una segunda parte se procedió a purificar y cultivar la cepa de
la microalga Haematococus pluvialis, en medios sólidos modificados para poder
inducir al estrés a esta microalga, obteniendo colonias de esta cepa estresada.
Luego se buscó comparar el funcionamiento del equipo Realplex2 y Varioskan LUX
para realizar el ensayo ORAC, para luego medir la capacidad antioxidante de los
extractos obtenidos utilizando una modificación del ensayo ORAC, denominado
ORAC-L, el cual utiliza una molécula llamada β-ciclodextrina metilada, para
solubilizar antioxidantes lipofílicos.
La capacidad antioxidante utilizando el ensayo ORAC-L, de los extractos obtenidos
en promedio fueron: para la muestra de extracto de la microalga H. pluvialis: 9690.00
eq. Trolox (μM)/ mL, para la muestra de extractos de microalgas obtenidas en los
fotobiorreactores: 5213.33 eq. Trolox (μM)/ mL; en ambos casos se utilizó
dimetilsulfóxido como solvente, y para el ensayo ORAC-H del extracto de la
microalga H. pluvialis: 2987.33 eq. Trolox (μM)/ mL. Estos valores respaldan
finalmente la hipótesis en la cual se planteaba obtener extractos antioxidantes a partir
de la microalga H. pluvialis.
Palabras clave: ORAC, Haematococcus pluvialis, Fotobiorreactores, Capacidad
antioxidante.
Description
Keywords
ORAC, Haematococcus pluvialis, Fotobiorreactores, Capacidad antioxidante