Evaluación de la Citotoxicidad de las Macamidas Sintéticas N-Bencilinolenamida y Metoxi-Bencilinolenamida en Líneas Celulares de Neuroblastoma SH-SY5Y
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Date
2018-12-06
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Publisher
Universidad Católica de Santa María
Abstract
En la actualidad, a pesar del avance en la medicina, el uso de la medicina natural
como agentes terapéuticos se ha convertido en una alternativa muy utilizada por
parte de los pobladores de distintas comunidades en nuestro país. La maca
(Lepidium meyenii) ha captado la atención por sus efectos beneficiosos para la
salud. Esta planta posee en su composición metabolitos secundarios llamados
macamidas los cuales se encuentran presentes en su raíz y se cree que tienen
efectos neuroprotectores. Sin embargo, al no estar sujetas a estudios
toxicológicos estas sustancias pueden ser tóxicas a determinadas
concentraciones.
El objetivo de esta investigación fue evaluar la citotoxicidad producida por las
macamidas sintéticas N-bencilinolenamida y Metoxi-bencilinolenamida en líneas
celulares de neuroblastomas SH-SY5Y. Utilizando el pasaje 7 con una viabilidad
celular de 95%, se estableció la concentración inhibitoria media (IC50) de ambas
macamidas sintéticas, obteniéndose una IC50 mayor para la macamida sintética
Metoxi-bencilinolenamida. Además, se evaluó si la citotoxicidad inducida por
estas macamidas sintéticas desencadenó la apoptosis mediante el ensayo de
caspasa 3. Por último, se evaluó la presencia de las proteínas p53 (proteína
supresora de tumores que activa la expresión de genes pro-apoptosis), PARP-1
(proteína activadora de muerte celular independiente de caspasa), Bcl-2
(proteína reguladora, marcador antiapoptótico) y LRP1 (Proteína de señalización
relacionada con el receptor de lipoproteína de baja densidad).
La IC50 encontrada para la macamida N-bencilinolenamida fue de 12.8 μM y de
la Metoxi-bencilinolenamida fue de 53.3 μM evaluando un rango de
concentraciones de 30 μM y 100 μM. Se confirmó la citotoxicidad producida por
ambas macamidas sintéticas a partir de las concentraciones previamente
mencionadas. También se encontró un incremento de las proteínas PARP-1 para
la concentración 10 μM de la macamida Metoxi-bencilinolenamida y Bcl-2 para
la concentración 10 μM de la macamida N-bencilinolenamida. La citotoxicidad
provocada por estas macamidas sintéticas no activó la ruta metabólica caspasa
3 en la línea celular SH-SY5Y. Además, en las imágenes de microscopía de
fluorescencia se pudo observar que existía una pequeña presencia de especies reactivas de oxígeno (EROS) para ambas macamidas.
Palabras claves: Lepidium meyenii, macamidas sintéticas, citotoxicidad, SHSY5Y, apoptosis.
Description
Keywords
Lepidium meyenii, macamidas sintéticas, citotoxicidad, SHSY5Y, apoptosis